[分享]消毒技术规范·物理去除残留消毒剂方法的鉴定
1)消毒剂 + 菌悬液 → 培养
观察消毒剂对试验菌有无杀灭或抑制作用。
2)(菌悬液 + 消毒剂) + 过滤冲洗法处理 → 培养
观察所用除药处理是否可使试验菌复苏生长。
3)(菌悬液 + 水) +过滤冲洗法处理 → 培养
观察除药处理是否影响试验菌的生长数量。
4)菌悬液 → 培养
将结果作为阳性对照值。
(2)操作程序如下:
1) 第 1 组。吸取消毒剂 4.5ml 于试管内,置 20℃±1℃水浴中 5min 后, 吸加0.5ml 菌悬液,混匀,作用至试验预定时间。吸取该最终样液0.5ml,加于含4.5ml 稀释液试管中,混匀。吸取最终样液 1.0ml 接种于平皿内,做活菌培养计数。
2) 第 2 组。吸取消毒剂 4.5ml 于试管中,置 20℃±1℃水浴中 5min 后,吸加 0.5ml 菌悬液,混匀。作用至试验预定时间,对其进行除药处理,并取最终样液 1.0ml 接种于平皿内,做活菌培养计数(如为滤膜法,可直接将滤膜有菌面朝上贴于平板表面)。如平皿生长菌落数均超过300 个,应再吸取该最终样液 0.5ml,用 PBS 做适当稀释,选择适宜稀释度悬液,吸取 1.0ml,分别接种于平皿内,做活菌培养计数。
3) 第 3 组。吸取稀释液4.5ml 于试管内,置20℃±1℃水浴 5min 后,吸加 0.5ml 菌悬液,混匀。不加消毒剂,做同上处理。取最终样液 0.5 ml 用稀释液做 10 倍系列稀释,选择 2个~3个适宜稀释度悬液,各取 1.0ml,分别接种于平皿内,做活菌培养计数(如为滤膜法,可先进行10 倍系列稀释,再经过滤冲洗法处理,然后直接将滤膜有菌面朝上贴于平板表面)。
4) 第 4 组。吸取试验菌悬液 0.5ml,置含 4.5ml 稀释液的试管中,不加消毒药物,亦不作任何除药处理,进行活菌培养计数,作为阳性对照值。
(3) 评价规定
试验结果符合以下全部条件,所测中和剂可判为合格:
1) 第 1 组无试验菌,或仅有极少数生长。
2) 第 2 组有远较第 1 组为多,但较第 3、4(组)为少的试验菌生长。在第 1 组无菌生长时,第 2 组平均每个平板 (或滤膜) 上生长菌落不少于 5 个。
3) 第 3、4 组测定的结果,微生物数量应在 5×`10^5` cfu/ml~5×`10^6` cfu/ml 之间, 其组间差不得超过两组回收菌数平均值的50%。组间差的计算可按下式进行:
4)连续 3 次试验取得合格评价。
5)使用过滤冲洗法。