如何制备透射电镜的样品?
透射电镜样品制备方法 样品在2.5%的戊二醛溶液中4℃固定过夜,然后按下列步骤处理样品: 倒掉固定液,用0.1M,pH=7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min; 用1%的锇酸...
透射电镜样品制备方法 样品在2.5%的戊二醛溶液中4℃固定过夜,然后按下列步骤处理样品: 倒掉固定液,用0.1M,pH=7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min; 用1%的锇酸溶液固定样品1-2h; 倒掉固定液,用0.1M,pH=7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min; 用梯度浓度(包括50%,70%,80%,90%和95%五种浓度)的乙醇溶液对样品进行脱水处理,每种浓度处理15min,再用100%的乙醇处理一次,每次20min;最后过度到纯丙酮处理20min; 用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=1/1)处理样品1h; 用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=3/1)处理样品3h; 纯包埋剂处理样品过夜; 将经过渗透处理的样品包埋起来,70℃加热过夜,即得到包埋好的样品。样品在Reichert超薄切片机中切片,获得70-90nm的切片,该切片经柠檬酸铅溶液和醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液各染色15min,即可在透射电镜中观察。 透射电镜样品包埋块制作有关注意事项 一、取材: 1、动作迅速:组织离体后,应将其快速放入固定液中,使组织细胞尽可能保持原来的生活状态; 2、减少损伤:选择锋利切割器械,减少牵拉或挤压组织; 3、组织...
透射电镜样品制备方法 样品在2.5%的戊二醛溶液中4℃固定过夜,然后按下列步骤处理样品: 倒掉固定液,用0.1M,pH=7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min; 用1%的锇酸溶液固定样品1-2h; 倒掉固定液,用0.1M,pH=7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min; 用梯度浓度(包括50%,70%,80%,90%和95%五种浓度)的乙醇溶液对样品进行脱水处理,每种浓度处理15min,再用100%的乙醇处理一次,每次20min;最后过度到纯丙酮处理20min; 用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=1/1)处理样品1h; 用包埋剂与丙酮的混合液(V/V=3/1)处理样品3h; 纯包埋剂处理样品过夜; 将经过渗透处理的样品包埋起来,70℃加热过夜,即得到包埋好的样品。样品在Reichert超薄切片机中切片,获得70-90nm的切片,该切片经柠檬酸铅溶液和醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液各染色15min,即可在透射电镜中观察。 透射电镜样品包埋块制作有关注意事项 一、取材: 1、动作迅速:组织离体后,应将其快速放入固定液中,使组织细胞尽可能保持原来的生活状态; 2、减少损伤:选择锋利切割器械,减少牵拉或挤压组织; 3、组织...
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